Revista Científica UDO Agrícola Volumen 9.
Número 1. Año 2009. Páginas: 175-181
Potencial efecto fungicida de extractos vegetales en el desarrollo in vitro del hongo Colletotrichum gloeosporioides
(Penz.) Penz. & Sacc. y de la antracnosis en frutos de mango
Potential
fungicidal effect of plant extracts on in
vitro development of Colletotrichum gloeosporioides
and on anthracnose of mango
Karina BOLÍVAR1, María Elena SANABRIA1, Dorian
RODRÍGUEZ 
1, María de CAMACARO2, Dilcia ULACIO1, Luís J. CUMANA3 y Oscar CRESCENTE3
1Programa
de Fitopatología y 2Programa de Horticultura, Postgrados de Agronomia. Universidad Centroccidental
“Lisandro Alvarado”, Cabudare, estado Lara, Venezuela y 3Universidad de Oriente. Núcleo de
Sucre. Escuela de Ciencias. Cumaná, estado Sucre, Venezuela. E-mails:
mesanabria@ucla.edu.ve,
rdorian@ucla.edu.ve y dulacio@ucla.edu.ve. Autor para correspondencia
|
Recibido: 10/06/2008 |
Fin
de primer arbitraje: 19/02/2009 |
Primera
revisión recibida: 08/05/2009 |
|
Fin de segundo arbitraje: 29/05/2009 |
Segunda revisión
recibida: 03/06/2009 |
Aceptado: 03/06/2009 |
RESUMEN
Se
determinó el efecto de la aplicación de los extractos etanólicos
(EE) de hojas de Azadirachta indica (‘nim’); Phyllanthus niruri
(‘flor escondida’); Calotropis procera (‘algodón de seda’); Lippia origanoides (‘orégano silvestre’); Gliricidia sepium (‘mata ratón’) y Heliotropium indicum (‘rabo
de alacrán’), colectadas en el estado Lara, Venezuela, en el control de la
antracnosis ocasionada por el hongo Colletotrichum gloesporioides en frutos de mango (Mangifera indica). El extracto se obtuvo por
presión reducida y se determinaron los grupos de metabolitos secundarios (MS)
presentes en ellos. El patógeno se hizo crecer en el medio nutritivo PDA. La
determinación del efecto de los EE a una concentración de 2,5% se hizo bajo tres
métodos de aplicación in vitro.
Frutos de mango fisiológicamente maduros fueron tratados con los extractos al
2,5 % y luego inoculados con el hongo. Se encontró que las plantas diferían en
los grupos de MS. El EE del L. origanoides y H. indicum, homogenizados en el medio, ocasionaron la
mayor disminución del crecimiento micelial de C. gloeosporioides. Los EE de L. origanoides
y G. sepium
fueron los mejores tratamientos de postcosecha, ya
que indujeron el 37 y 33 % menos de la enfermedad en los frutos de mango,
respectivamente. Los resultados indican el potencial de los extractos para el
manejo de la antracnosis del mango en postcosecha.
Palabras clave:
Postcosecha,
metabolitos secundarios, Mangifera indica L
ABSTRACT
The effect of applying ethanolic extracts (EE) of leaves of Azadirachta indica (‘nim’); Phyllanthus niruri (‘flor escondida’); Calotropis procera (‘algodón de seda’); Lippia origanoides (‘orégano silvestre’); Gliricidia sepium (‘mata ratón’) and Heliotropium indicum (‘rabo de alacrán’) collected in the state of Lara, Venezuela, on the
control of mango anthracnose caused by Colletotrichum gloeosporioides was evaluated The plant extract was
obtained by reduced pressure and the secondary metabolites (MS) were
determined. The microorganism was grown on PDA media. The effect of the EE at
2.5 % concentration was evaluated following three methods of application. Mango
fruits at the adequate ripening stage were treated with the concentration of
2.5 % and then inoculated with the fungus. Differences were found in the plants
extracts with regard to the MS present. L.
origanoides and H. indicum EE, homogenized in the medium
caused the highest inhibition of C. gloeosporioides mycelium. The EE of L. origanoides
and G. sepium
were the best postharvest treatment since they induced 37 and 33 % less disease
in mango fruits. Results indicate the potential of plant extracts to handle
mango anthracnose in postharvest.
Key
words: Postharvest, secondary metabolites, Mangifera indica L.
INTRODUCCION
Los plaguicidas sintéticos han generado beneficios en
la producción agrícola; sin embargo el empleo inadecuado de los mismos,
expresado en términos de tipo, toxicidad, número de aplicaciones y dosificación
han producido contaminaciones que afectan al suelo, agua, aire y productos
agrícolas, por la acumulación de residuos potencialmente dañinos a la salud
humana y de los animales (Dinham y Malik, 2003). El interés por el uso de los extractos vegetales (EV) con este fin se ha incrementado
considerablemente, con prometedores resultados de investigaciones in vitro e in vivo, con especies de plantas de diferentes ambientes ecológicos
y abundantes en la naturaleza (Satufer et al., 2000; Rodríguez y Montilla,
2002; Zapata et al., 2003; Araujo et al., 2008; Rodríguez y Sanabria,
2005; Henriques et
al., 2005).
Las enfermedades más comunes en frutas y hortalizas
después de la cosecha, son las mayores causas de pérdidas de los productos en
comercios, restaurantes y hogares. Los daños son de tipo fisiológico y
patológico; en el caso de infecciones ocasionadas por hongos, se recurre a
cuidadosas prácticas de manejo del cultivo, del producto durante la cosecha y
del almacenamiento, con el saneamiento de los sitios de empaque y el uso de
envases especiales, pretendiéndose con
esto disminuir el desarrollo de
microorganismos, lo que generalmente no es suficiente recurriéndose a
fungicidas sintéticos, aplicados en baños o por aspersión (Valor y Manzano,
2000; Usall et
al., 2003).
La antracnosis es reconocida como una de las
enfermedades más importantes en el cultivo del mango (Mangifera indica L.) y es ocasionada
por el hongo Colletotrichum
gloeosporioides
(Penz.) Penz. & Sacc. Esta
enfermedad se hace evidente por la aparición de manchas oscuras en hojas,
flores, pedúnculos y frutos, estos
últimos pueden ser infectados en la etapa de desarrollo, mostrando los daños al
llegar a la madurez por lo que la alta incidencia de la enfermedad dificulta la
comercialización (Arias y Carrizales, 2007).
El control de la antracnosis se
realiza con la aplicación programada de diversos fungicidas, durante la fase
productiva (Avilán et al., 1996) o en los frutos ya cosechados (Arias y Carrizales,
2007). Las restricciones en muchos países exigen la limitación en el uso de
estos productos, por razones toxicológicas y ambientales, lo que obliga a
realizar investigaciones y a desarrollar métodos de controles alternativos y/o
complementarios al uso de agroquímico.
Entre los extractos vegetales que han mostrado efectos
en el control de plagas agrícolas están los de Azadirachta indica A. Juss.,
Meliaceae,
los cuales son utilizados para el control de artrópodos (Asher
et al., 1995). Los EV de Phyllanthus niruri L., Euphorbiaceae han demostrado ser efectivos contra Bipolaris maydis y Rhizoctonia solani en
maíz (Rodríguez y Sanabria, 2005), los de Calotropis procera (Aiton) W.T. Aiton, Asclepiadaceae, contra nemátodos (Perichi et al.,
2007), los de Lippia origanoides Kunth, Verbenaceae, contra B. maydis, R. solani (Rodríguez y Sanabria, 2005), Fusarium oxysporum
f. sp. lycopersici (Henriquez et al.,
2005) y F. oxysporum
f. sp. cubense (Araujo et al., 2008); los de Gliricidia sepium (Jacq.) Kunth
ex Walp., Fabaceae,
contra Sclerotium rolfsii
(Torrealba, 2006) y los de Heliotropium indicum L., Boraginaceae,
contra Mycosphaerella fijiensis
(Hernández et al., 2005). Estas
experiencias demuestran la posibilidad de uso de estas plantas para el control
de otros patógenos, por lo que se planteó como objetivos de esta investigación
a) determinar el efecto de la aplicación de los extractos etanólicos
(EE) de hojas de ‘nim’, ‘flor escondida’, ‘algodón de
seda’, ‘orégano silvestre’, ‘mata ratón’ y ‘rabo de alacrán’ sobre el
crecimiento micelial de C. gloeosporioides y la antracnosis ocasionada por
este hongo en frutos de mango; b) determinar la presencia de los grupos de
metabolitos secundarios en los EE.
MATERIALES Y MÉTODOS
1.
Obtención de extractos etanólicos y determinación de
los grupos de metabolitos secundarios.
El material vegetal utilizado para la obtención de los
EE consistió en hojas aparentemente sanas y plenamente desarrolladas de las
plantas seleccionadas, colectadas en diferentes localidades del estado Lara,
las cuales se secaron a la sombra y se pulverizaron en una licuadora
convencional OsterMR. El polvo resultante
(250 g) se maceró en etanol 96% (2.500 mL) por 24h; se filtró y se realizó la extracción del crudo
a presión reducida en un rotavapor BrinkmannMR. El EE se guardó en botellas ámbar a
8oC. La determinación de los grupos de alcaloides, aceites
esenciales, flavonoides, saponinas, polifenoles y
taninos se realizó siguiendo la metodología de Marcano y Hasegawa
(2002).
2.
Determinación del efecto in vitro de
los extractos etanólicos sobre el crecimiento micelial de C. gloeosporioides
Se usó la metodología utilizada por Rodríguez y
Sanabria (2005). La cepa del hongo C. gloeosporioides se obtuvo en el Laboratorio de
Micología del Postgrado de Fitopatología de
La variable evaluada fue el crecimiento micelial, midiendo el diámetro de la colonia luego de 10 d
de incubación a 27 ±
3.
Determinación del efecto de los extractos etanólicos
sobre la antracnosis en frutos de mango
Los frutos de mango ‘Bocado’ común se cosecharon directamente de plantas ubicadas en las
instalaciones de los Postgrados de Agronomía de
Se utilizó un diseño completamente al azar, los datos
de incidencia y severidad se sometieron al análisis de varianza y la
comparación de medias por la prueba de Tukey (P=0,05)
(Steel and Torrie, 1980). Se utilizó el programa PC-
SAS (SAS, 1999).
RESULTADOS
1.
Determinación de los grupos de metabolitos secundarios en extractos etanólicos
En base a la metodología utilizada, se
determinó que los EE de todas las plantas utilizadas poseían alcaloides,
aceites esenciales, polifenoles y taninos (Cuadro 1).
Las diferencias se presentaron en cuanto a las saponinas, antraquinonas y los
flavonoides. L. origanoides,
P. niruri y G.
sepium carecían solo de saponinas. Las
antraquinonas estuvieron ausentes en C.
procera y A. indica; en éste
último, además, no se detectaron los flavonoides. H. indicum mostró la presencia de todos
los grupos de MS analizados (Cuadro 1).
|
Cuadro 1. Grupos de metabolitos secundarios
determinados en extractos etanólicos de Lippia origanoides, Phyllanthus niruri, Azadirachta indica, Gliricidia sepium, Heliotropium indicum y Calotropis procera. |
||||||
|
Especie |
Alcaloides1 |
Aceites esenciales |
Polifenoles y Taninos |
Saponinas |
Antraquinonas |
Flavonoides |
|
L. origanoides |
+++ |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
|
P.
niruri |
+++ |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
|
A.
indica |
+++ |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
|
G.
sepium |
+++ |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
|
H.
indicum |
+++ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
|
C.
procera |
+++ |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
|
Presencia (+); Ausencia (-); 1Se
determinaron tres tipos de alcaloides: débilmente básicos, básicos y sales
cuaternarias de amonio, representados por las tres cruces. |
||||||
2.
Determinación del efecto in vitro de los
extractos etanólicos sobre el crecimiento micelial de C. gloeosporioides
Los resultados mostraron que no hubo
diferencias significativas (P = 0,5) entre los métodos de aplicación de los
extractos de A. indica (NIM), P. niruri (FE),
C.
procera (AS) y G. sepium
(MR) en cuanto al desarrollo micelial de C. gloeosporioides,
los cuales se comportaron estadísticamente similar a los testigos (Cuadro 2). L. origanoides,
(OS) por otra parte, si mostró diferencias, encontrándose tres grupos
estadísticos; la mezcla del EE con el medio fue el método más efectivo, el cual
no permitió el crecimiento de la colonia; el segundo lugar en efectividad se
observó impregnando el papel de filtro en el extracto y colocándolo en el
extremo opuesto al hongo (Cuadro 2). El EE de H. indicum (RA) fue más efectivo con el
papel de filtro y en segundo lugar con las gotas colocadas sobre el medio.
|
Cuadro
2. Crecimiento micelial (cm) de Colletotrichum gloeosporioides
en PDA con extractos etanólicos (EE) de hojas de
NIM (Azadirachta indica); flor escondida (Phyllanthus niruri)
(FE); algodón de seda (Calotropis procera) (AS); orégano silvestre (Lippia origanoides)
(OS); mata ratón (Gliricidia sepium)
(MR) y rabo de alacrán (Heliotropium indicum)
(RA). Concentración de los EE 2,5 %. |
|
||||||||||||
|
Tratamientos |
NIM |
FE |
AS |
OS |
MR |
RA |
|||||||
|
Papel+EE
(T1) |
5,38 |
a |
8,16 |
a |
8,93 |
a |
3,73 |
b |
8,53 |
a |
1,95 |
c |
|
|
Papel+Agua
(T1-0) |
7,53 |
a |
8,93 |
a |
8,38 |
a |
9,20 |
a |
8,23 |
a |
9,20 |
a |
|
|
Gotas de EE (T2) |
7,13 |
a |
8,13 |
a |
8,95 |
a |
7,55 |
a |
8,95 |
a |
6,10 |
b |
|
|
Gotas agua (T2-0) |
6,60 |
a |
5,85 |
a |
8,68 |
a |
5,73 |
ab |
8,68 |
a |
5,73 |
b |
|
|
EE+PDA (T3) |
9,20 |
a |
9,20 |
a |
8,88 |
a |
0,00 |
c |
8,88 |
a |
9,20 |
a |
|
|
PDA sin EE (T3-0) |
9,20 |
a |
9,20 |
a |
9,20 |
a |
9,20 |
a |
9,20 |
a |
9,20 |
a |
|
|
Medidas con las mismas letras no difieren significativamente
en las pruebas de Tukey (P = 0,05) |
|||||||||||||
3.
Determinación del efecto de los extractos etanólicos
sobre la antracnosis en frutos de mango.
Diez días después de iniciado el ensayo se constató la
presencia de las lesiones necróticas típicas de la antracnosis sobre la
superficie de los frutos de mango inoculados con C. gloeosporioides demostrándose así el
ataque del patógeno en todos los tratamientos, incluyendo el testigo. Se
encontraron diferencias significativas entre los tratamientos (P = 0,05) con la
menor severidad del daño en los frutos tratados con L. origanoides y H. indicum, donde el tamaño de las
lesiones fue de 22 y 23 mm, respectivamente, lo que representó una disminución
del daño de 37 y 33 %, respectivamente, con respecto al testigo (Cuadro 3). Los
resultados de los otros extractos se agruparon en un segundo grupo estadístico,
intermedio entre el testigo y los EE antes mencionados; en ellos se observaron
valores de 20 y 30% de reducción de la lesión con respecto al testigo.
|
Cuadro 3. Diámetro de
la lesión de antracnosis y reducción
de la lesión con respecto al testigo. en frutos de mango inoculados con Colletotrichum gloeosporioides
y tratados con extractos etanólicos de Nim, flor escondida, algodón de seda, orégano silvestre,
mata ratón y rabo de alacrán. |
|||
|
Tratamientos |
Diámetro de la lesión (mm) |
Reducción de la lesión (%) |
|
|
Inoculado,
sin EE (T) |
35,06 |
a |
- |
|
Nim |
28,08 |
ab |
19,9 |
|
Flor
Escondida |
26,08 |
ab |
25,6 |
|
Algodón
de Seda |
24,60 |
ab |
29,8 |
|
Orégano
Silvestre |
22,04 |
b |
37,1 |
|
Mata
Ratón |
23,32 |
b |
33,5 |
|
Rabo
de Alacrán |
24,26 |
ab |
30,8 |
|
(T):
Testigo Medias con las mismas letras no difieren significativamente en las pruebas de Tukey (P = 0,05). |
|||
DISCUSIÓN
El análisis preliminar de los grupos mayores de
metabolitos secundarios presentes en los extractos vegetales de las plantas evaluadas
mostró las diferencias entre ellas, las cuales se deben, entre otras razones,
al hecho de que pertenecen a familias distintas (Izco,
2004) o a que provienen de diversas zonas del estado Lara, con características
ambientales diversas (Piñol et al., 2000). La ausencia de un grupo, sin embargo, puede también
significar que no se encontraba en la hoja en el momento del análisis, ya sea
por su traslado a otros órganos o por su destrucción previo a la determinación
(Izco, 2004). En todo caso, la actividad antifúngica de los extractos fue evaluada en un tiempo muy
corto luego de su obtención de los EE, por lo que los resultados obtenidos
podrían asociarse con los metabolitos detectados.
Los grupos de MS detectados en C. procera y G. sepium coincidieron con los obtenidos por Bittara (2005) y Torrealba (2006), aún
cuando las plantas se colectaron en zonas diferentes a las utilizadas por estos
autores. Así mismo, los encontrados en A.
indica fueron igualmente señalados por Asher et al. (1995) y Gómez et al. (2002) en semillas y hojas de
esta misma planta; todo esto podría indicar cierto nivel de confianza en los
compuestos esperados y su utilización. No obstante, como Izco
(2004) indica, es necesaria la identificación exacta de los compuestos y su
cuantificación.
La forma mas efectiva de
exponer el hongo al extracto fue la mezcla homogénea en el medio de
crecimiento, de esta manera el patógeno está en contacto con el producto desde
el inicio de su desarrollo. Los otros métodos evaluados permiten el crecimiento
de la colonia por cierto tiempo antes de que el extracto alcance el micelio.
Utilizando este método, el extracto mas efectivo en
el control del hongo fue el de L. origanoides, lo cual ha sido consistente con lo
observado en otras pruebas donde se evaluó contra Bipolaris maydis, Rhizoctonia
solani (Rodriguez y Sanabria, 2005) y Fusarium oxysporum f. sp.
lycopersici
(Henriquez et
al., 2005). Este comportamiento del extracto ha sido asociado con los
fenoles (Rodriguez, 2007), aunque no se ha definido cual de ellos es el responsable. El segundo extracto con
efectividad sobre C. gloeosporioides,
pero utilizando el método de papel impregnado, fue el de H. indicum, con el cual se obtuvo una
disminución del crecimiento micelial del 78 %. Este
EE también ha mostrado tener efecto sobre Mycosphaerella fijiensis en
plátano (Vargas, 2008) y podría ser considerado su uso, posiblemente, con dosis
mayores.
Los resultados del ensayo in vivo corroboraron los obtenidos in vitro, demostrándose el potencial de L. origanoides para el control de la
antracnosis en mango. Colletotrichum
puede penetrar el vegetal directamente o por heridas (O’Connell
et al., 2000), por lo que el presente
ensayo se estableció con una infección forzada, posterior a la herida causada
en el mango; bajo tales condiciones el EE de L. origanoides logró mantener la
severidad de la antracnosis con un 37 % menos que en el control. En condiciones
menos severas de infección y con un tratamiento preventivo, es posible que el
nivel de protección con el extracto sea mayor. En cuanto a G. sepium, su extracto mostró igualmente
su acción en la reducción de la antracnosis, a pesar de que la prueba in vitro indicaba poca efectividad sobre
el patógeno; esto quizás se deba a la presencia de algún tipo de resistencia
inducida, en la que el extracto haya promovido la formación de algún compuesto
(fenólico) que haya frenado el desarrollo de la enfermedad (El Modafar y El Boustani, 2004); sin
embargo, esto merece ser investigado. Los otros extractos evaluados también
mostraron cierto nivel de control, lo que indica que puede haber más de un
extracto con potencial de uso para la prevención de la antracnosis en mango y
que posiblemente su acción dependa de la dosis utilizada.
CONCLUSIONES
El
extracto mas significativo para el control in vitro e in vivo de C. gloeosporioides fue el de las hojas de ‘orégano
silvestre’, el cual en dosis bajas podría ser utilizado para prevenir la
enfermedad. Los extractos de ‘mata ratón’ (G.
sepium), ‘rabo de alacrán’ (H. indicum), ‘algodón de seda’ (C. procera), ‘flor escondida’ (P. niruri) y ‘nim’ (A. indica)
fueron también efectivos en la reducción de la enfermedad y se recomienda
evaluarlos con dosis mas altas.
LITERATURA CITADA
Araujo, D.; D. Rodríguez y M. Sanabria.
2008. Respuesta del hongo Fusarium oxysporum f. sp. cubense, causante
del Mal de Panamá, a algunos extractos y fungicidas. Fitopatologia
Venezolana 21: 2-8.
Arias B. y L. Carrizales. 2007. Control químico
de la antracnosis del mango (Mangifera
indica L.) en pre y postcosecha en el municipio
Cedeño, estado Monagas, Venezuela. Bioagro. 19 (1):
19-25.
Asher, K.; M. Isman, M. Jacohson and C. Ketkar. 1995. The
neem tree (Azadirachta indica) and other Meliaceous
Plants. Edit. H. Schmutterer, New
York. 693 pp.
Avilán,
L.; A. Rengifo y A. Carmelo. 1996. El mango. Editorial
Americana, C.A. Caracas, Venezuela. 401 pp.
Bittara,
F. 2005. Evaluación de fungicidas y productos vegetales en el control de la
sarna polvorienta de la papa causada por Spongospora subterranea (Wallr.)
Langerh. Trabajo de Grado para Ingeniero Agrónomo.
Universidad Centroccidental “Lisandro Alvarado”. 78 pp.
Dinham, B. and S. Malik. 2003.
Pesticides and human rights. Int. J. Occup. Envron. Health. 9: 40-52.
El Modafar,
C. y E. S. El Boustani. 2004. Contribución de los polifenoles a los mecanismos de defensa de la plantas. In: Biopesticidas
de Origen Vegetal. Editores Catherine Regnault-Roger,
Bernard J. R. Philogène y Charles Vincent.
Ediciones Mundi-Prensa, Madrid. p. 173-190.
Gómez, C.; A. Soto
y L. Flores. 2002.
Evaluación de extractos vegetales para el manejo del picudo negro del
plátano (Cosmopolite sordidus Germar.)
Universidad de Caldas. Boletín de Fitotecnia No. 65. Manizales, Colombia.20 pp.
Henriques, L.; D. Rodríguez; M. E. Sanabria y O. Crescente. 2005. Inhibición del crecimiento micelial in vitro
de Fusarium oxysporum
f sp lycopersici con
extractos de Opuntia sp.; Lippia origanoides y
Croton rhamnifolius.
SABER. 17: 133-134.
Hernandez, J.; D. A. Rodríguez, M. E. Sanabria, G. Blanco y N.
Sanabria. 2005. Efecto de extractos etanólicos de Heliotropium indicum L., Lippia origanoides
H.B.K. y Phyllanthus niruri L. en
plantas de banano ‘cambur manzano’ (Musa
AAB) para el control de Mycosphaerella fijiensis Morelet en Yaracuy, Venezuela. XVII Congreso de
Izco, J. 2004. Botánica, 2ª
Edición. Mc GrawHill. Interamericana de España, 906
pp.
Marcano, D. y
M. Hasegawa. 2002. Fitoquimica
Orgánica. Caracas. U.C.V. CNDCH. 520 pp.
Mitra, S.
K. and E. A. Baldwin. 1997. Mango. In:
Postharvest Physiology and Storage of Tropical and Subtropical Fruits. Ed. Sisir Mitra. CAB International. p. 85-122.
O’Connell, R.; S. Perfect, B. Hughes, R. Carzaniga,
J. Bailey and J. Green.
2000. Dissecting the cell biology of
Colletotrichum
infection process. In: Colletotrichum Host Specificity, Pathology and Host-Pathogen Interaction. Editores Dov Prusky, Stanley Freeman y Martin B. Dickman.
APS Press St Paul, Minnesota. p. 37-77.
Pierichi, G.; R. Crozzoli, B. Delgado, M. Ochoa, A. Masselli
y C. Rosales. 2007. Evaluación preliminar in vitro de la
actividad nematicida del extracto etanólico de hojas de algodón de seda sobre juveniles de segundo estadio de Meloidogyne incognita.
Fitopatologia Venezolana 20: 83. (Resumen).
Piñol, M.; J. Palazón y R. Cusidó.
2000. Introducción al metabolismo secundário. In: Fundamentos de Fisiologia Vegetal.
Editores Joaquin Azcón Bieto
y Manuel Talón. Mc GrawHill
Interamericana. p. 261-283.
Rodriguez, J. L. 2007. Aislamiento, cuantificación y efecto de los metabolitos secundarios de Lippia origanoides H.B.K. in
vitro sobre el crecimiento
micelial y La esporulación
de Fusarium oxysporum Schltoll. f.sp. cubense y Colletotrichum gloeosporioides
Penz. Trabajo
de Grado para Ingeniero Agrónomo. Universidad Centroccidental
“Lisandro Alvarado”. 56 pp.
Rodríguez, D. y J.
Montilla. 2002. Disminución de la marchitéz causada
por Fusarium en tomate con extracto
de Citrus paradise.
Manejo Integrado de Plagas (Costa Rica) 63: 46-50.
Rodríguez, D.
y M. E. Sanabria. 2005. Efecto del extracto de tres plantas silvestres sobre la
rizoctoniosis, la mancha sureña del
maíz y los patógenos que la causan. Interciencia 30 (12): 739-744.
SAS Institute. 1999. SAS user’s guide: Statistics. 8th
edition. SAS Inst
Inc., Cary, North Carolina, EEUU.
Staufer,
A.; A. Orrego y A. Aquino. 2000. Selección de extractos
vegetales con efecto fungicida y/o bactericida. Revista de Ciencia y
Tecnología, Dirección de Investigaciones (UNA) 1 (2): 29-33.
Steel, G. y J. Torrie. 1980.
Bioestadística. Principios y Procedimientos. Ed. McGraw-Hill. New York. 301
pp.
Torrealba, S. 2006. Cuantificación de
metabolitos secundarios en extractos etanólicos de Gliricidia sepium (Jacq.) Steud y Calotropis procera (Ait.)
Ait.F. y el efecto de dichas plantas sobre el
desarrollo in vitro de Sclerotium rolfsii. Trabajo
de Grado para Ingeniero Agrónomo. Universidad Centroccidental
“Lisandro Alvarado”. 59 pp.
Usall, J.; P. Plaza e I. Viñas. 2003. Tratamientos químicos en poscosecha de frutas. Sistemas actuales y propuestas para
mejoría. Vida Rural. No. 172. 25 pp.
Valor, O. y J.
Manzano. 2000. Efecto del tratamiento hidrotérmico,
temperatura y tiempo de almacenamiento sobre el mango criollo “Bocado” (Mangifera indica
L.) .II. Parámetros químicos. Tecnologías Postcosecha
3:11-15.
Vargas, J. L. 2008. Evaluación del efecto de
tres extractos vegetales sobre la Sigatoka Negra, el
desarrollo y la producción en el cultivo de plátano (Musa AAB cv. ‘Harton’). Trabajo de Grado para Ingeniero Agrónomo. Universidad
Centroccidental “Lisandro Alvarado”. 36 pp.
Zapata, R.; M. E. Sanabria
y D. Rodríguez. 2003. Reducción del desarrollo de hongos fitopatógenos
con extractos de cardón lefaria (Cereus deficiens Otto & Diert).
Interciencia 28: 302-306.
Página diseñada
por Prof. Jesús Rafael Méndez Natera
TABLA DE CONTENIDO DE LA REVISTA CIENTÍFICA UDO
AGRÍCOLA
